Метаболическая активность клеток врожденного иммунитета

Выявление методом иммунохемилюминесценции спонтанной и индуцированной

кислородзависимой бактерицидной активности нейтрофилов.

Изучение фагоцитарной и метаболической активности нейтрофилов – эффекторных клеток врожденного иммунитета, имеет большое значение в оценке противоинфекционной функции системы иммунитета человека. Нейтрофильные гранулоциты обладают множеством бактерицидных механизмов противомикробной защиты. Одним из наиболее эффективных механизмов уничтожения поглощенных путем фагоцитоза патогенов являются кислород-зависимые механизмы. Реализуются кислород-зависимые механизмы за счет продукции активных форм кислорода (АФК): супероксидного радикала кислорода – (О2-) и перекиси водорода (Н2О2) – и др. соединений, обладающих мощной окислительной активностью и летальным действием на патогены. Одним из ферментных комплексов, катализирующих продукцию активных форм кислорода является NOX2-содержащий NADPH-оксидазный комплекс, который восстанавливает молекулярный кислод до микробицидных форм.

Врожденные дефекты NADPH-оксидазного комплекса приводят к редкому иммунодефициту, известному как хроническая грануломатозная болезнь (ХГБ), первоначальное название – "фатальное гранулематозное заболевание детей». Отсутствием АФК объясняется предрасположенность пациетов с ХГБ к инфекциям и ряду осложнений с образованием гранулем в месте воспалительной реакции. Сцепленная с полом форма ХГБ является более тяжелой по сравнению с аутосомно-рецессивной формой. Система NADPH-оксидазного комплекса может избыточно активироваться или подавляться при вторичных влияниях, связанных с различными заболеваниями человека, приемом медикаментов, питанием, факторами окружающей среды.

Существует несколько скрининговых методов изучения продукции свободных радикалов фагоцитирующими лейкоцитами. Одним из наиболее простых в использовании является цитохимический метод регистрации АФК по степени восстановления красителя - нитросинего тетразолия (т.н. НСТ-тест). Более точным и стандартизированным методом является используемый нами метод регистрации метаболической активности продукции АФК по регистрации хемилюминесценции клеток. Тест используют для измерения базовой спонтанной и индуцированной фагоцитозом (латекс, бактерии, грибы) продукции АФК. Результаты позволяют своевременно выявить и предотвратить нарушения противоинфекционной защиты по причине снижения кислородзависимой бактерицидной активности нейтрофилов.