Количественное определение ДНК TREC и KREC в крови методом ПЦР (для оценки степени дифференцировки, зрелости и активности T и B лимфоцитов)

Исследование, направленное на определение количества ДНК TREC и KREC в крови.

Первичные иммунодефициты (ПИД) – большая группа заболеваний, связанных с разнообразными врожденными генетическими нарушениями механизмов иммунной защиты организма, что приводит к развитию тяжелых хронических инфекций и часто к летальному исходу или инвалидизации в раннем возрасте за счет формирования необратимых изменений в органах и тканях. По статистике, на первом месте среди первичных иммунодефицитов находятся гуморальные дефекты (61%), на втором месте – комбинированные иммунодефицитные состояния (18%). (Ярцев М.Н., и соавт., 2006). Данные группы иммунодефицитов характеризуются полным или частичным отсутствием T- и/или B-клеток, или ослаблением функций этих клеток. В связи с этим, ранняя диагностика и своевременная патогенетическая терапия первичных иммунодефицитных состояний (ПИДС) улучшает исход.

Для выявления нарушений Т- и В-клеточного звеньев иммунной системы используется методика, измерения уровней TREC и KREC – побочных продуктов формирования Т- и В-клеточных рецепторов, которая позволяет судить о количестве функционально зрелых Т- и В-лимфоцитов.

В процессе созревания Т- и В-лимфоцитов в тимусе и костном мозге происходит формирование клеточных рецепторов посредством перестройки генов в цепи ДНК, с целью создания уникального участка, распознающего чужеродный агент. Во время каждой такой рекомбинации из цепи вырезается небольшой фрагмент, образующий эксцизионное кольцо. Эти кольца получили названия TREC (T-cell Receptor Excision Circle) и KREC (Kappa-deleting Recombination Excision Circle). TREC сопровождают созревание практически всех T-лимфоцитов, а KREC – всех В-лимфоцитов и, таким образом, служат маркерами их количества. У здоровых новорожденных и далее в течение жизни молекулы TREC и KREC образуются в больших количествах соответственно возрастным нормам, в то время как у детей с ТКИН и агаммаглобулинемией количество TREC и KREC находятся на не детектируемом уровне. Снижение количества TREC и/или KREC в крови свидетельствует о наличии иммунодефицитных состояний.

Лаборатория «ЮНИЛАБ» предлагает новое лабораторное исследование, позволяющее оценить уровни TREC и KREC с помощью набора реагентов «БиТ-тест» для количественного определения ДНК TREC и KREC методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Анализ может быть проведен как с использованием цельной крови, так и с ДНК, полученной из сухих пятен крови, собираемых в ходе национальной программы скрининга новорожденных.

Данная методика особенно актуальна в педиатрической практике для ранней диагностики первичных иммунодефицитных состояний (ПИДС). Также исследование применяется для оценки функциональной активности тимуса, скрининга и дифференциальной диагностики иммунодефицитных состояний (ИДС).